潔凈室氣浮細菌的檢測主要有兩種方法:一種是自然沉降;另一種是強制濺射。主要參考的標準是《醫藥工業潔凈室(區)浮游菌的測試方法》(GB/T 16293-1996)和《醫藥工業潔凈室(區)沉降菌的測試方法》(GB/T 16294-1996)。沉降法的采樣時間較長,速度較慢;濺射法的采樣時間較短,速度較快。兩種檢測方法得到的數據雖然相關,但并不等同。前者測得的是一定的時間內平均沉降到每個培養皿中的細菌個數,后者測得的是1m3的空氣中的細菌的個數。
1、需要的器材設備
氣浮細菌濃度的檢測除需要氣浮細菌采樣器外,還需要高溫高壓滅菌器、細菌培養皿、細菌培養基、恒溫恒濕細菌培養箱、放大鏡、生物顯微鏡等。
2、檢測操作
(1)采樣前的準備
1)將培養皿通過121℃濕熱滅菌20min或180℃干熱滅菌2h。
2)將培養基加熱熔化,冷至45℃,在無菌操作條件下,將約60mL培養基注入直徑為150mm的培養皿中。
3)有培養基的培養皿宜在2~8℃的環境中存放。
(2)細菌的采集
1)準備采樣器材時應在5級潔凈環境中進行。
2)對氣浮細菌采樣器進行清潔滅菌處理,防止采樣器上的細菌脫落進入培養皿中產生檢測誤差。
3)將采樣器的氣流量調節到標準量值。
4)將帶有培養基的培養皿置于采樣器的轉盤上,并取下培養皿的上蓋。將培養皿的上蓋正置于潔凈的環境中。
5)蓋上采樣器的透明罩,將濺射距離調節到標準量值。
6)選取采樣點。采樣點離回風口的距離應不小于1m,采樣點離地0.8~1.5m(略高于工作面)
7)根據預計的細菌濃度確定采樣量,根據采樣量和氣流量選定采樣時間,然后開機采樣。
(3)細菌的培養
1)采樣器采樣結束后,在5級潔凈環境中開啟采樣器的透明罩。蓋上培養皿的上蓋,將培養皿置于細菌培養箱中。
2)細菌培養的溫度為30~35℃,細菌培養的時間不少于48h。
(4)計算細菌濃度
1)統計培養皿中的菌落數。
2)氣浮細菌濃度g按下式計算:
g=1000G/TQ
式中,g為氣浮細菌濃度,pc/m3
G為培養皿中的菌落數,cfu
Q為氣浮細菌采樣器的氣體流量,L/min
T為氣浮細菌采樣器的采樣時間,min