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按照美國國家規范^[2] 的要求，PCD由16塊全棉手術巾做成23cm*23cm*15cm大小的布包，中間可分別單獨放入或同時放入生物指示物和第五類化學指示物，與布包組成一次性PCD，稱為生物挑戰測試包或化學挑戰測試包。該尺寸的PCD只適合容積大于56.6L的壓力蒸汽滅菌器。小型滅菌器的PCD應依據實際滅菌包裹來決定PCD的大小。

根據歐盟的規范^[3] ，PCD應選取大小約90cm*120cm的純質白棉布，經線每厘米織數為（30+-6）根，緯線每厘米織數為（27+-5）根。全新狀態和每次使用后的棉布都需要進行的清洗，且不能使用織物洗滌柔順劑。每次清洗后棉布需要自然晾干，且在攝氏15-25度，30%-70%相對濕度的環境中放置1小時。用放置后的棉布打制成長寬約為30cm*22cm，高約25cm的測試包，質量為（7+-0.7）kg。

我國新消毒技術規范^[4] 對標準生物PCD的制作方法要求如下：

A)標準指示菌株：嗜熱脂肪桿菌芽孢，菌片含菌及抗力符合國家有關標準；

B)標準測試包的制作：由16條41CM*66cm的全棉手術巾制成。制作方法：講每條手術巾的長邊先折成3層，短邊折成2層，然后疊放，制成23cm*23cm*15cm大小的測試包；

C)標準生物PCD的制作方法：將至少一個標準指示菌片裝入滅菌小紙袋內或至少一個自含式生物指示劑，置于標準測試包的中心部位即完成標準生物測試包或生物PCD的制作；

D)培養方法：經一個滅菌周期后，在無菌條件下取出標準測試包的指示菌片，放入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養基中，經56+-1攝氏度培養7天（自含式生物指示物按產品說明書執行），觀察培養結果；

E)結果判定：陽性對照組培養陽性，陰性對照組培養陰性，實驗組培養陰性，判定為滅菌合格；陽性對照組培養陽性，陰性對照組培養陰性，實驗組培養陽性，判定為滅菌不合格；同時應進一步鑒定試驗組陽性的細菌是否為指示菌或是污染所致。自含式生物指示物不需要做陰性對照；

F)小型壓力蒸汽滅菌器因一般無標準測試包，應選擇滅菌器常用的、有代表性的滅菌包制作生物PCD，置于滅菌器最難滅菌的部位，且滅菌器應處于滿載狀態。生物PCD應側放，體積大時可平放；

G)采用快速壓力蒸汽滅菌程序進行滅菌時，應直接將一支生物指示物放在空載的滅菌器內，經一個滅菌周期后取出，在規定的條件下培養觀察結果；

H)可使用一次性標準生物PCD，對滅菌器的滅菌質量進行生物監測；

I)注意事項：

1）監測所用菌片或自含式菌管應取得衛生部消毒產品衛生許可批件，并在有效期內使用；

2）如果1d內進行多次生物監測，且生物指示劑為同一批號，則只設一次陽性對照即可。